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dc.contributor.advisorBrito Neto, Rubens Vuono de
dc.contributor.authorRodrigues, Janaina Candida
dc.coverage.spatialSão Paulo
dc.date.accessioned2020-06-16T22:03:06Z
dc.date.available2020-06-16T22:03:06Z
dc.date.issued2018
dc.identifier.urihttps://digital.bibliotecaorl.org.br/handle/forl/184
dc.identifier.urihttps://doi.org/10.11606/T.5.2018.tde-07112018-132314
dc.description.abstractINTRODUÇÃO: A exposição a níveis elevados de pressão sonora é a segunda causa mais comum de perda auditiva sensorioneural adquirida. Está relacionada à morte celular por apoptose, necrose e/ou necrose programada (necroptose) devido ao dano mecânico e/ou metabólico, ocasionando a degeneração de estruturas cocleares como células ciliadas, sobretudo externas, células de suporte e de fibras aferentes do nervo coclear. Estudos têm demostrado um aumento na citocina inflamatória TNFa após a exposição ao ruído, bem como a melhoria auditiva relacionada ao uso de etanercepte, que é um bloqueador destacitocina. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar o efeito do silenciamento gênico do Tnfa na audição de ratos Wistar, expostos ao ruído branco, e identificar o perfil de expressão gênica na via metabólica desse gene. METODOLOGIA: Foram incluídos ratos Wistar do sexo masculino, jovens com limiar auditivo no Peate clique de 50 dBSPL. Os animais foram submetidos à introdução do siRNA Tnfa em uma orelha, e siRNA scramble na orelha contralateral por via trans-timpânica com posterior exposição à 120 dBSPL de ruído branco por 3h. Foi realizado Peate clique e remoção das cócleas para obtenção do cDNA e avaliação da expressão gênica da via metabólica do Tnfa por meio de qRT-PCR. Um grupo de animais, não submetidos ao silenciamento, foi exposto ao ruído para análise dessa via metabólica. Para o cálculo da expressão gênica relativa (Rq) utilizamos o método do deltaCT comparativo e o teste t-Student pareado para avaliar os parâmetros no Peate clique. RESULTADOS: A taxa de silenciamento observada foi de 74,1%. A média do limiar eletrofisiológico nas orelhas silenciadas foi estaticamente melhor que a orelha scramble (p < 0,001) com valores médios de 49,5 +- 10.5. A amplitude média da onda I em 80 dBSPL e das ondas II e IV em 90 dBSPL foi estatisticamente maior na orelha siRNA Tnfa, sem alteração na latência nas intensidades audíveis,para ambos os lados. A exposição ao ruído promoveu aumento da expressão do gene Tnfa e de seu receptor Tnfrsf1A, 24h após à exposição, associado ao aumento da expressão de genes relacionados à apoptose e diminuição de genes relacionados à sobrevida celular. CONCLUSÃO: O ruído promoveu aumento de expressão do gene Tnfa e de genes envolvidos na apoptose, associado à perda auditiva em modelo experimental. A administração trans-timpânica do siRNA Tnfa promoveu preservação do limiar eletrofisiológico e da amplitude da onda I, II e IV no Peate clique, após exposição ao ruído intenso, sugerindo que a inibição deste pode ser uma estratégia de preservação auditiva promissora. O silenciamento do Tnfa inibiu a disfunção coclear após estímulo acústico, sugerindo que esta proteína é um dos principais agentes envolvidos na perda auditiva induzida pelo ruído, devendo ser considerada como alvo terapêutico na estratégia de preservação auditiva
dc.source.urihttps://teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5143/tde-07112018-132314/publico/JanainaCandidaRodrigues.pdf
dc.subjectApoptosis,Tumor necrosis factor-alphaen
dc.subjectAuditory evoked potentialen
dc.subjectEvoked responseen
dc.subjectNoise induced hearing lossen
dc.subjectRNA interferenceen
dc.subjectApoptosept_BR
dc.subjectAudiometria de resposta evocadapt_BR
dc.subjectFator de necrose tumoral alfapt_BR
dc.subjectPerda auditiva induzida por ruídopt_BR
dc.subjectPotencial evocado auditivopt_BR
dc.subjectRNA de interferênciapt_BR
dc.subject.classificationOtologia
dc.titleEfeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica
dc.typeTese de Doutorado
dc.contributor.institutionUniversidade de São Paulo
dc.identifier.doi10.11606/T.5.2018.tde-07112018-132314
dc.contributor.schoolFaculdade de Medicina
dc.contributor.departmentOtorrinolaringologia


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